PCR
ポリメラーゼ・チェーン・リアクション。DNA鑑定などでも使われるのでご存知の方も多いでしょう。
これがうまく行かない(弱った〜)。
一度に複数のDNAを増幅しようと思っているのですが、どうも鋳型cDNAをそれぞれのプライマーが取り合っているような気がします。理論的には同じTmにデザインすれば同じぐらいの結合能力になるから、均等に増えてくれそうなのですが...
プライマーダイマーばっかり増えてしまった(笑)。
そんなにダイマーができる配列じゃないのですが....
そもそも鋳型のcDNAは大丈夫なのだろうか(と疑心暗鬼になってくる)。というのもRTの際のRNAが少なかったからなぁ....
鋳型との出会うチャンスも同じだろうし...
Tmを振ってみるしかないのかなぁ。それは面倒くさいし、何か良い手は無いものでしょうか。って無いからぼやいているのですが....
これがうまく行かない(弱った〜)。
一度に複数のDNAを増幅しようと思っているのですが、どうも鋳型cDNAをそれぞれのプライマーが取り合っているような気がします。理論的には同じTmにデザインすれば同じぐらいの結合能力になるから、均等に増えてくれそうなのですが...
プライマーダイマーばっかり増えてしまった(笑)。
そんなにダイマーができる配列じゃないのですが....
そもそも鋳型のcDNAは大丈夫なのだろうか(と疑心暗鬼になってくる)。というのもRTの際のRNAが少なかったからなぁ....
鋳型との出会うチャンスも同じだろうし...
Tmを振ってみるしかないのかなぁ。それは面倒くさいし、何か良い手は無いものでしょうか。って無いからぼやいているのですが....
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